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不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響

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  摘要:目的:探究不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響情況。方法:選取60例冬蟲夏草,根據隨機分組原則分為鮮冬蟲夏草組(20例)、37℃曬干組(20例)和60℃烘干組(20例)。比較三組冬蟲夏草蛋白質成分情況。結果:與37℃曬干組和60℃烘干組相比,鮮冬蟲夏草組的蛋白質含量(4.502±0.23)mg/g和蛋白分子量(52.6±5.1)kDa均較高(P<0.05)。結論:不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響較顯著,其中鮮冬蟲夏草具有最高的蛋白質含量。
  關鍵詞:不同干燥條件;冬蟲夏草;蛋白質成分;影響
  冬蟲夏草屬于一種菌蟲復合體,它為傳統的中藥材,其藥用歷史十分悠久。同時冬蟲夏草具有止血化痰,治療肺部疾病的作用[1]。從現代藥理學角度來講,冬蟲夏草存在抗氧化、抗腫瘤及免疫調節的功效,它的活性成分有蛋白、多糖及核苷等。在冬蟲夏草藥材中,蛋白類成分屬于一種十分關鍵的活性成分,其主要功能包括降壓、抗菌及抗腫瘤。在干燥過程中,蛋白類成分會發生結構和理化性質方面的改變,使其功效和品質受到嚴重影響[2]。遂本文主要探究不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響情況。
  1資料與方法
  1.1一般資料
  選取60例冬蟲夏草,根據隨機分組原則分為鮮冬蟲夏草組、37℃曬干組和60℃烘干組,每組分別包含20例冬蟲夏草樣本。
  1.2方法
  提出冬蟲夏草粗蛋白的方法為:通過料理機勻漿以后,將鮮冬蟲夏草在-20℃環境下保存。37℃曬干組的冬蟲夏草是在溫度為37℃的環境下將鮮冬蟲夏草曬干12小時后獲得;60℃烘干組的冬蟲夏草是在溫度為60℃的恒溫烘箱中將鮮冬蟲夏草曬干12小時獲得。通過研磨機將冬蟲夏草樣品粉碎。對冬蟲夏草樣品粉末稱取0.2g,將其放置于研缽中,將6ml蛋白提取液加入,在冰盒上進行30分鐘的研磨,使其成為勻漿,同時向離心管中轉移,離心溫度為4℃,離心時間為15分鐘。將上清液100uL向新的離心管中轉移,將0.07%DTT和預冷丙酮1.5ml加入后,將其搖勻,然后放置在-20℃環境中進行6小時的沉淀處理,將上清液棄掉,然后進行揮干處理就可以將粗蛋白樣品獲得,然后按照Bradford方法對蛋白含量進行準確測定。
  1.3SDS-PAGE蛋白分析
  在離心管中加入粗蛋白溶液100uL,將0.07%DTT和預冷丙酮1.5ml加入后,將其搖勻,然后放置在-20℃環境中2小時。將上清液棄掉,然后進行揮干處理,然后將20uL純水溶解蛋白加入,按照說明書對蛋白進行純化。在12%的SDS-PAGE上樣孔中將2uL Marker和20uL蛋白質樣品加入,然后進行電泳處理,首先進行低電壓60V的設置,然后逐漸調節至120V。取出凝膠以后,對其進行固定、顯色等相關處理,最后通過相關軟件對凝膠圖譜實行有效處理。
  1.4觀察項目
  比較三組冬蟲夏草蛋白質成分情況。
  1.5統計學分析
  運用SPSS22.0統計學軟件對計量資料進行分析,表示方法為“(均數±標準差)”、檢驗方法為“t”,用P<0.05表示結果有差異。
  2結果
  2.1比較三組冬蟲夏草蛋白質成分情況
  鮮冬蟲夏草組冬蟲夏草含量為(4.502±0.23)mg/g,37℃曬干組冬蟲夏草含量為(2.506±0.31)mg/g,60℃烘干組冬蟲夏草含量為(1.142±0.21)mg/g。相比于37℃曬干組和60℃烘干組,鮮冬蟲夏草組存在較高的蛋白質含量(P<0.05)。
  2.2比較三組冬蟲夏草蛋白質分子量情況
  鮮冬蟲夏草組蛋白質分子量(52.6±5.1)kDa明顯高于37℃曬干組(34.1±4.3)kDa和60℃烘干組(21.1±4.1)kDa(P<0.05)。
  3討論
  冬蟲夏草具有較多的功效,蟲草素是其主要的活性成分,美白除黑、益氣養血、止血化痰、補肺益腎、抗疲勞、抗腫瘤及調節免疫系統功能等是冬蟲夏草的主要作用功效,此外,冬蟲夏草還能夠發揮保健的作用[3]。但在不同的環境影響下,冬蟲夏草的蛋白質成分會有所變化。相關研究顯示,對冬蟲夏草干燥溫度的升高會減少其蛋白質含量,同時干燥條件的不同也會改變其蛋白質分子量[4]。
  本文通過探究不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響情況,相關數據顯示,與37℃曬干組和60℃烘干組相比,鮮冬蟲夏草組的蛋白質含量(4.502±0.23)mg/g和蛋白分子量(52.6±5.1)kDa均較高(P<0.05),主要原因可能在于如果干燥溫度較高,可能會使冬蟲夏草蛋白質發生變化。綜上所述,不同干燥條件對冬蟲夏草蛋白質成分的影響較明顯,其中鮮冬蟲夏草具有最高的蛋白質含量,隨著環境溫度的升高,會明顯減少冬蟲夏草蛋白質含量和蛋白質分子量,可見干燥方法的不同對藥材蛋白存在不同的影響,上述研究結果的發現有利于促進冬蟲夏草相關干燥工藝的發展。
  參考文獻:
  [1]錢正明,李春紅,李文慶等.冬蟲夏草蛋白圖譜及干燥條件對超氧化物歧化酶活性影響[J].菌物學報,2016,35(4):424-432.
  [2]梅雪艷,李媛媛,沈于蘭等.冬蟲夏草、蟲草菌絲體及蛹蟲草中核苷類成分的測定[J].藥學與臨床研究,2015,23(1):27-29.
  [3]李展平,真田則明,孫素琴等.冬蟲夏草中甘露醇和蟲草素的TOF-SIMS分析[J].光譜學與光譜分析,2016,36(4):1230-1234.
  [4]胡抗遠,王全興,鮑蕾蕾等.復方冬蟲夏草口服液對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化的影響[J].中國藥房,2018,29(14):1912-1916.
  作者簡介:丁佳駿 男 1991-6 本科 助理工程師
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