中藥檢驗中色譜技術的應用實踐及研究進展探析
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【摘 要】在新醫改形勢下，如何保證中藥材安全有效應用值得藥學工作者和臨床醫師共同關注。為了推進現代技術在中藥檢驗領域的應用，綜述近年來現代技術在中藥檢驗領域的運用及發展，分析常見現代色譜技術在中藥檢驗、質量控制領域的應用優勢。
【關鍵詞】中藥檢驗；色譜技術；應用前景；研究進展
隨著現代檢驗技術的逐步發展，各種先進儀器和技術不斷引進并應用于中藥檢驗、中藥質量監控等領域，現代技術在中藥檢驗技術的應用已取得一些進展。在藥學工作者的不斷努力下，現在儀器分析技術廣泛應用于中藥檢驗中，對中藥質量控制起到至關重要的作用。由于新儀器、新技術的引入，拓寬了中藥檢驗的范圍與深度，在檢測手段及分離模式方面均表現出一定的優越性，在一定程度上提升了中藥檢驗的準確性、靈敏度與選擇性[1]。
1薄層色譜法
2000年版中國藥典中收載記錄的中藥材、中藥成方制劑共計992種，其中采用色譜方法檢驗的制劑品種占收載品種總數的49%，表明色譜技術在中藥檢驗中的重要地位[2]。在中藥檢驗鑒定中，色譜法已經成為不可缺少的常規有效方法，對于一些成分復雜的中藥、天然藥物等，存在分離與分析鑒定的雙重優勢。例如對熊膽和其他膽汁混合偽造的偽品、西洋參與生曬參偽造的偽品，應用傳統理化方法鑒別難度較大，應用薄層色譜法可以快速簡單進行鑒別，其分離快、靈敏度高、分辨率高、專屬性好等優勢決定了未來在中藥檢驗領域的應用前景[3]。張麗艷等[4]采用薄層色譜法12批余慶吳茱萸藥材及9批其他不同產地的吳茱萸和2種偽品進行薄層色譜比較，分析了不同產地吳茱萸所含化學成分在含量的差別，為評價吳茱萸品質優劣、GAP規范化種植及質量監控提供了有力的依據。
2氣相色譜法
氣相色譜法適用于揮發性成分或通過衍生化后能夠氣化的成分的定性與定量分析，靈敏度較高且分離效率高。在含揮發油成分中藥材鑒定分析中，氣相色譜法已經成為一種首選的色譜技術。對于不揮發成分的定量與定性，可以應用裂解氣相色譜法進行鑒定。如龍腦、檸檬烯、芳樟醇的測定，以及經衍生化反應后用于分析生物堿類、內酯類、脂肪類、酚類、糖類等其他成分，也可用于中藥殘留溶劑的檢驗。陸繼偉等[5]應用固相萃取-氣象色譜雙塔雙柱法測定白果、肉桂、人參、紅花、廣藿香、銀杏葉等中藥樣品的有機磷類農藥殘留量，在中藥樣品基質、三水平添加條件下，農藥回收率多在70.0%～120.0%，檢測限大多地域0.01 mg/kg，符合農藥多殘留檢測要求。進一步證實氣相色譜法在中藥材樣品有機磷類農藥殘留檢測中的應用，具有基質干擾小、靈敏度高、重現性好等多重優勢。
3高效液相色譜法
高效液相色譜法在中藥檢驗中的應用，具有柱效高、分離度好、重現性好等優點，可以對中藥材成分進行分析。高效液相色譜法適用于具有紫外吸收的化合物的分析，可進行含量測定或定性分析。伴隨樣品純化技術的提高，采用液液萃取、超臨界萃取、液固萃取，使分離效率高的HPLC法能夠對中藥成分進行準確定量。李文博等[6]采用變換波長檢測法建立了養血清腦顆粒HPLC指紋圖譜，確定了35個共有色譜峰在藥材中的歸屬。應用液相色譜-質譜聯用法鑒定部分化學成分，并對制劑中的4種指標性成分進行定量檢測。研究解決表明制劑與藥材具有良好的色譜峰相關性，且指標性成分在各自濃度范圍內線性關系良好。
4毛細管電泳法
毛細管電泳（CE）是近年來迅速發展的新技術，在藥物分析尤其是中藥檢驗領域均有研究報道。例如阿魏酸的測定通常采用薄層色譜法和高效液相色譜法，應用毛細管區帶電泳法相較于上述兩種色譜技術，表現出高效、經濟、回收率好、重現性好等明顯優勢。高效毛細管電泳（HPCE）將電泳技術與色譜技術相結合，具有分離效率高、樣品用量少、靈敏度高等特點，顯露出電泳與色譜技術的雙重優勢，是目前中藥檢驗領域十分重要分離、分析技術。
李紹平等[7]應用高效毛細管電泳法測定天然與人工冬蟲夏草和苷類成分含量，得出濕熱能增加天然冬蟲夏草核苷類物質含量這一結論。陳志良等[8]應用高效毛細管電泳法對寧夏枸杞和枸杞果實蛋白多肽進行測定，結果兩者高效毛細管電泳圖譜差異明顯。此法在三七及菊葉三七、紫蘇子及其混淆品的鑒別中均收到良好鑒別效果，結果滿意。車磊等[9]建立了桂附地黃丸毛細管區帶電泳指紋圖譜，對12批桂附地黃丸的質量進行鑒別，此法具有較好的精密度與重現性，為全面控制和評價桂附地黃丸提供了新的方法。
5超臨界流體萃取及色譜
超臨界流體萃取技術是在超臨界流體基礎上產生的色譜技術，利用超臨界流體的低粘度性質，運用二氧化碳作為流動相，分離色譜柱一般采用固定相填充柱，對中藥材樣品或固體中藥制劑中的化學成分進行分析，質量好、速度快、分析效率快，適用于酚類、有機酸、揮發油等中藥復雜成分的分析。超臨界流體萃取技術可在低溫下操作，兼具HPLC和GC的優點，適合對不穩定、揮發性強、易氧化成分進行提取，在中藥檢測與提取中具有獨特的優勢。常憶凌等[10]應用夾帶甲醇（流速0.4 mL·min-1）的超臨界CO2萃取六味地黃丸中的丹皮酚，此法操作簡便快速，準確性好，適用于中藥復方制劑中有效成分的提取分離。
參考文獻：
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[2]朱妙琴.天麻等中藥材的裂解-氣相色譜指紋鑒別[J].中國現代應用藥學，2005，14（04）：191.
[3]唐濤，張維冰，李彤，等.六味地黃丸組分的二維液相色譜分離[J].分析化學，2007，22（12）：47.
[4]張麗艷，羅君，李健，等.吳茱萸藥材薄層色譜指紋圖譜研究[J].中國實驗方劑學雜志，2011，12（12）：176.
[5]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.固相萃取-氣相色譜雙塔雙柱法同時測定中藥材中53種有機磷類農藥殘留量[J].中成藥，2010，09（01）：149.
[6]李文博，韓建平，高鈞，等.養血清腦顆粒的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].分析化學，2011（03）：122.
[7]李紹平，李萍，季暉，等.天然與發酵培養冬蟲夏草中核苷類成分的含量及其變化[J].藥學學報，2001，36（6）：436.
[8]陳志良，陳振德，侯連兵，等.枸杞子蛋白多肽的高效毛細管電泳法鑒別[J].中國藥學雜志，2001，36（3）：79-81.
[9]車磊，孫國祥，李閆飛.桂附地黃丸的毛細管電泳指紋圖譜研究[J].中南藥學，2011（06）.
[10]常憶凌，劉本.超臨界流體萃取六味地黃丸中的丹皮酚[J].中國中藥雜志，2006，31（8）：172.
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